標題: 結合逆流層析與反微胞技術萃取及濃縮蛋白質分子
作者: 賴雋仁
余艇
應用化學系碩博士班
關鍵字: 逆流層析;逆流層析儀;反微胞;逆微胞;萃取;濃縮;蛋白質;蛋白質分子
公開日期: 2001
摘要: 本實驗選擇含有陰離子型界面活性劑sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate (AOT) 的正己烷溶液為反微胞有機相,以有機相為靜相,水溶液相為動相,並以高速逆流層析儀(high speed counter-current chromatograph)當作一高效率之萃取裝置。當含有生物分子的水溶液流經管柱中的靜相時,蛋白質分子會被萃取至反微胞相中而滯留在分離管柱中;待正向萃取完成後,注入高pH值的鹼性溶液,藉由動相的帶動改變反微胞相的環境,使蛋白質分子轉移至此一水溶液中,完成反向萃取,並在過程中達成濃縮蛋白質分子。在對單一成分蛋白質cytochrome c之回收效率探討中,我們使用50 mM AOT萃取100 mg/l cytochrome c可以達到95.4%之回收率;而我們也使用未事先經過平衡之動靜相溶劑系統針對20 mg/l cytochrome c進行萃取,結果發現:在同樣以90 mM AOT為靜相之條件下,此系統所得之回收率(78.7%)高於採用經過平衡之溶劑系統所得到之回收率(62%);最後我們嘗試針對酵素混合溶液,在逆流層析儀中進行選擇性的分離萃取。
URI: http://140.113.39.130/cdrfb3/record/nctu/#NT900500050
http://hdl.handle.net/11536/69278
顯示於類別:畢業論文