標題: 透過結構模擬與蛋白質工程重組幾丁聚醣水解酵素之研究
Structural simulation and protein engineering of Bacillus circulans MH-K1 chitosanase
作者: 留佩君
李耀坤
關鍵字: 幾丁聚醣;幾丁聚醣水解酵素;chitosan;chitosanase
公開日期: 2008
摘要: 本研究是先對Bacillus circulans MH-K1幾丁聚醣水解酵素做出結構模擬,再針對我們所選定的模擬結構在基因的T185後以AQPPKPS胺基酸片段取代掉原本的FYN片段,希望能改變其催化型態;之後將其建構在本實驗室之前所建立的CBP V5載體,使其在大腸桿菌JM109宿主細胞中表現。經過純化後可得約90%均質度的蛋白質。 我們對此重組蛋白質做了基本的特性研究,並將其結果與野生株相比較,發現雖然在二級結構上兩者十分相似,對溫度的反應活性亦相近,但是野生株酵素的水解產物以幾丁二醣,幾丁三醣為主要,此重組酵素的水解產物卻是以幾丁一醣、幾丁二醣、幾丁三醣所組成的混合物,顯示經過突變後,其活化中心的催化型態有所改變,未來可對結構模擬再做改進,繼續朝蛋白質工程方向改造酵素。
URI: http://140.113.39.130/cdrfb3/record/nctu/#GT009499505
http://hdl.handle.net/11536/38045
Appears in Collections:Thesis


Files in This Item:

  1. 950502.pdf